两种方法检测肺炎支原体抗体的比对分析
论文作者:同为论文网 论文来源:caogentz.com 发布时间:2016年11月14日

肺炎支原体可引起人类原发性非典型性肺炎,为呼吸道感染疾病中较为常见的一种病原体,卞要表现为咳嗽、咳痰、气喘、不规则发热等。肺炎支原体感染后病程隐匿,临床症状表现的严重程度不一,常见于幼儿,容易出现漏诊、误诊的情况,因此研究检测肺炎支原体抗体的有效方法对该疾病的及旱诊断和治疗意义重人,也为各级医院选择单一检测方法提供依据。国内虽有多篇相关文章报道,但由于各个厂家试剂质量不同而其灵敏度和特异性有所不同。我I坑民期以来采用两种方法检测肺炎支原体抗体,研究分析了安图的IF A和欧蒙的ELISA两种检测方法对于肺炎支原体抗体检测的特异性和灵敏度。

1资料与方法

1. 1一般资料

选取2015年1-8月到我院就诊的疑似肺炎支原体感染者160例,其中女62例,男98例,年龄2个月一78岁,平均年龄( 8. 36±13.6)岁。诊断标准参照《内科学》,所选病例均为初步诊断:急性支气管炎、支气管哮喘、社区获得性肺炎、喘息性支气管炎、疑似肺炎支原体感染者。

1.2标本采集与保存

抽取静脉血2m1分离血清,当天完成检测,样本检测由专人操作。

1.3检测方法

IF采用西班牙V IRCELL公司生产的试剂翻安图),应用IFA法对MP I进行测定,仪器为OLYMPUS BX51荧光显微镜,以40%以上McCoy细胞出现典型膜齿荧光为阳性;ELISA:采用德国欧蒙医学实验诊断股份有限公司生产的试剂盒(欧蒙),仪器为瑞士TecanF50酶标仪,标本与阳性对照的比值> 1. 1为阳性,0. 8- 1. 1为临界值,C 0. 8为阴性。试验过程严格按说明书操作。

1.4观察指标比较

两种检测方法检测肺炎支原体抗体的特异性和灵敏度。

1.5统计学方法

数据全部采用SPSS13. 0统计软件处理分析,计数数据经才检验,FC 0. OS表示差异具有统计学意义。

2结果

2. 1两种检测方法的检测结果比较

160例疑似肺炎支原体感染患者中,两种检测方法检测结果均为阳性的有130例,均为阴性的有2例,IFA检测为阳性、ELISA检测阴性的有20例;IF A检测阴性、ELISA检测阳性的有8例。两种检测方法检测结果具有明显差异,有统计学意义。

2.2两种检测方法特异性和灵敏度比较

另收集:50例ELISA法测定阳性的血清进行IFA法检测,40例阳性;180例IFA法测定阳性的血清进行ELISA法检测,146例阳性。IFA检测灵敏度为93. 750 a, ELISA灵敏度为860a,两者灵敏度比较前者比后者高;IFA检测特异性为81 0 a, ELISA特异性为800a,两者特异性儿乎相同。

3讨论   

肺炎支原体是一种原核细胞微生物,介于病毒与细菌之间,是导致呼吸系统疾病的卞要病原体,由于环境污染,感染率有逐年上升的趋势,肺炎支原体感染后6- 7d产生IgM抗体,半个月抗体浓度达高峰,而后转为IgG抗体由于肺炎支原体所致症状较为复杂,特别是婴幼儿及免疫功能低下者,Mg IgM生成不足影响检出率。一旦确诊为肺炎支原体感染及时进行有效的治疗效果甚好。因此研究检测肺炎支原体抗体的最佳方法对该病的及旱诊断与治疗存在现实意义。  

 本文重在比对分析安图的IFA法和欧蒙的ELISA法对肺炎支原体的检出率(灵敏度)和准确性(特异性),结果表明:IFA法的灵敏度达到93. 75与阳红梅等报道的一致;ELISA法只有860a,与李海平等报道的一致Isle与魏欣球报道的不一致“,这可能由其试剂质量引起。IF A法利用Mg IgM与吸附在载玻片上的经肺炎支原体感染的McCoy细胞中肺炎支原体结合产生特异性膜齿荧光,McCoy细胞中肺炎支原体是天然微生物,保持了原有的抗原性,使其检出率人人提高,其阳性率比传统的ELISA法高,这与艾根伟等报道相同}'I; ELISA法中包被的是经纯化的抗原,在制备纯化抗原过程中可能会丢失某些片段,影响其特异性结合而影响检出率。笔者在实验中总结了对特异性膜齿荧光的界定:膜齿荧光是McCoy细胞边缘出现极薄的、完整的环状荧光,有部分不完整时,如M cCoy细胞出现伪足状荧光也可判为阳性,McCoy细胞边缘出现点状荧光多为非特异性荧光应判为阴J幽经与ELISA比对符合率达100但关中不足的是:IFA法需要配备荧光显微镜和需要有较强辨别膜齿荧光的能力,卞观意识强,易受人员素质影响,这是该法的缺点之一。如果两种方法同时检测将使检测特异性提高到99%以上,但检测成本高。建议对于IF A法有疑虑的结果用ELISA法复查可提高准确性。   

研究中,笔者与临床医生沟通,听取临床医生对ELISA法中临界范围的患者的治疗经验,也电话回访了部分ELISA法中临界范围的患者,采用人环内酷类抗生素规范治疗4-7d后,疗效显著,建议临床医生重视临界范围的结果,结合临床症状及时给予治疗。   

综上所述,肺支原体采用安图的IFA检测特异性与灵敏度均优于欧蒙的ELISA,有条件的医院推荐应用,选择该方法尽旱确定病原体、避免盲日使用抗生素具有重要的现实意义。


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